AAT Bioquest  22904  Cell Meter™ 熒光細胞內(nèi)總 ROS 活性檢測試劑盒*針對流式細胞術(shù)進行了優(yōu)化*

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AAT Bioquest 熒光細胞內(nèi)總ROS活性試劑盒-常備現(xiàn)貨

美國 AAT Bioquest Inc.(前身是 ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學檢測領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AATBioquest 的產(chǎn)品幫助 quan shi jie 的科學家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學，免疫學，細胞生物學和分子生物學等領(lǐng)域。AAT Bioquest 會不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest  22904  Cell Meter™ 熒光細胞內(nèi)總 ROS 活性檢測試劑盒*針對流式細胞術(shù)進行了優(yōu)化*  100 Tests，產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號：22904

產(chǎn)品名稱：Cell Meter™ 熒光細胞內(nèi)總 ROS 活性檢測試劑盒*針對流式細胞術(shù)進行了優(yōu)化*

產(chǎn)品規(guī)格：100 Tests

AAT Bioquest 熒光細胞內(nèi)總ROS活性試劑盒-常備現(xiàn)貨 

AAT Bioquest  22904  Cell Meter™ 熒光細胞內(nèi)總 ROS 活性檢測試劑盒*針對流式細胞術(shù)進行了優(yōu)化*  100 Tests，產(chǎn)品說明：

活性氧（ROS）是氧正常代謝的天然副產(chǎn)物，在細胞信號傳導中起重要作用。然而，在氧化應(yīng)激相關(guān)狀態(tài)下，ROS水平會急劇增加。ROS的積累導致細胞結(jié)構(gòu)的嚴重損害。氧化應(yīng)激在心血管疾病，糖尿病，骨質(zhì)疏松癥，中風，炎癥性疾病，許多神經(jīng)退行性疾病和癌癥中的作用已經(jīng)得到很好的確立。ROS測量將有助于確定氧化應(yīng)激如何調(diào)節(jié)不同的細胞內(nèi)途徑。細胞計™熒光 ROS 檢測試劑盒使用我們 du te 的 Amplite® ROS Green 傳感器來量化活細胞中的 ROS。Amplite® ROS Green是細胞滲透性的。當它與ROS反應(yīng)時，它會產(chǎn)生綠色熒光。細胞計™熒光 ROS 檢測試劑盒提供靈敏的一步熒光檢測，可在孵育一小時后檢測活細胞中的細胞內(nèi) ROS。該試劑盒針對流式細胞術(shù)應(yīng)用進行了優(yōu)化，其信號可通過 Ex/Em = 490/520 nm（FL1 通道）進行檢測。

組件

組件A：Amplite™ ROS 綠色—1瓶

組分B：檢測緩沖液—1瓶 （10 mL）

組件C：DMSO—1瓶 （200 μL）

1.    制備密度為 0.5 - 1 × 10 的細胞⁶細胞/毫升

2.    將 1 μL 500X Amplite™ ROS 綠液加入 0.5 mL 細胞懸液中

3.    將細胞在37oC下染色1小時

4.    處理細胞以誘導ROS

5.    使用具有FL1通道的流式細胞儀分析細胞（Ex / Em = 490 / 520 nm）

重要說明：在開始實驗之前，請在室溫下解凍所有組分。

儲備液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。避免反復凍融循環(huán)。

1.    Amplite ROS 綠色儲備溶液 （500X）：將 100 μL DMSO（組分 C）加入 Amplite ROS 綠色（組分 A）小瓶中，并充分混合制成 500X Amplite™ ROS 綠色儲備溶液。

™™避光。注意：儲存時，請密封管子。

實驗方案樣本

1.    對于每個樣品，在 0.5 mL 檢測緩沖液（組分 B）或您選擇的緩沖液中制備細胞，密度為 5×105至 1×106細胞/毫升。注意：應(yīng)單獨評估每個細胞系，以確定用于ROS誘導的最佳細胞密度

2.    將 1 μL 500X Amplite™ ROS 綠色儲備溶液加入 0.5 mL 細胞懸液中。

3.    在37oC孵育1小時。注意：對于貼壁細胞，用0.5 mM EDTA輕輕提起細胞以保持細胞完整，并在用Amplite™ ROS Green孵育之前用含血清的培養(yǎng)基洗滌細胞一次。適當?shù)姆跤龝r間取決于所使用的單個細胞類型和測試化合物。優(yōu)化每個實驗的孵育時間。

4.    通過在所需緩沖液（例如 PBS 或 HBSS）中加入 50 μL 11X 測試化合物來處理細胞。對于對照孔（未處理的細胞），加入相應(yīng)量的緩沖液。

5.    將細胞在37oC孵育所需的時間以誘導ROS，避光。注意：我們用100μM TBHP（叔丁基過氧化*）在37oC下處理Jurkat細胞30分鐘以誘導ROS。有關(guān)詳細信息，請參見圖 1。

6.    使用具有FL1通道的流式細胞儀（Ex / Em = 490 / 520 nm）監(jiān)測熒光強度。對感興趣的細胞進行門控，不包括碎片。

產(chǎn)品訂購信息：

22904  Cell Meter™ 熒光細胞內(nèi)總 ROS 活性檢測試劑盒*針對流式細胞術(shù)進行了優(yōu)化*  100 Tests