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AAT Bioquest 22838 細胞計™ PE-Annexin V 結合細胞凋亡檢測試劑盒 *針對流式細胞術進行了優(yōu)化* 100Tests,產品簡介:產品貨號:22838產品名稱:細胞計™ PE-Annexin V 結合細胞凋亡檢測試劑盒 *針對流式細胞術進行了優(yōu)化*產品規(guī)格:100TestsAAT Bioquest 結合細胞凋亡檢測試劑盒-常備現貨
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品牌 | AAT Bioquest | 貨號 | 22838 |
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規(guī)格 | 100 Tests | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | 細胞計™ PE-Annexin V 結合細胞凋亡檢測試劑盒 *針對流式細胞術進行 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),制藥 |
AAT Bioquest 22838 細胞計™ PE-Annexin V 結合細胞凋亡檢測試劑盒 *針對流式細胞術進行了優(yōu)化*
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AAT Bioquest 結合細胞凋亡檢測試劑盒-常備現貨
美國 AAT Bioquest Inc.(前身是 ABD Bioquest,Inc.)是一家為從事生命科學研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學家研發(fā)、生產和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學檢測領域,包括吸收(顏色),熒光和發(fā)光技術。AATBioquest 的產品幫助 quan shi jie 的科學家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學,免疫學,細胞生物學和分子生物學等領域。AAT Bioquest 會不斷介紹新產品,快速的豐富各個領域的產品。
AAT Bioquest 22838 細胞計™ PE-Annexin V 結合細胞凋亡檢測試劑盒 *針對流式細胞術進行了優(yōu)化* 100Tests,產品簡介:
產品品牌:AAT Bioquest
產品貨號:22838
產品名稱:細胞計™ PE-Annexin V 結合細胞凋亡檢測試劑盒 *針對流式細胞術進行了優(yōu)化*
產品規(guī)格:100Tests
AAT Bioquest 結合細胞凋亡檢測試劑盒-常備現貨
AAT Bioquest 22838 細胞計™ PE-Annexin V 結合細胞凋亡檢測試劑盒 *針對流式細胞術進行了優(yōu)化* 100Tests,產品說明:
膜聯蛋白V可與包括PE在內的熒光染料偶聯。這種形式保留了其對磷脂酰絲an酸(PS)的高親和力,因此可作為正在經歷細胞凋亡的細胞流式細胞術分析的靈敏探針。由于PS的外化發(fā)生在細胞凋亡的早期階段,因此PE膜聯蛋白V染色可以在比基于核變化(如DNA片段化)的測定更早的階段識別細胞凋亡。PE膜聯蛋白V染色先于膜完整性的喪失,伴隨著由凋亡或壞死過程引起的細胞死亡的最新階段。因此,PE膜聯蛋白V染色通常與重要染料(如碘化丙啶(PI)或7-氨基放線菌素(7-AAD))結合使用,以使研究者能夠識別早期凋亡細胞(7-AAD陰性,PE膜聯蛋白V陽性)。具有完整膜的活細胞排除7-AAD,而死亡和受損細胞的膜可滲透7-AAD。例如,被認為是活的細胞是PE膜聯蛋白V和7-AAD陰性,而處于早期細胞凋亡的細胞是PE膜聯蛋白V陽性和7-AAD陰性,而晚期細胞凋亡或已經死亡的細胞都是PE膜聯蛋白V和7-AAD陽性。該測定不區(qū)分經歷凋亡死亡的細胞和因壞死途徑而死亡的細胞,因為在任何一種情況下,死細胞都會用PE膜聯蛋白V和7-AAD染色。然而,當隨著時間的推移測量細胞凋亡時,通??梢詮?span>PE膜聯蛋白V和7-AAD陰性(活或無可測量的細胞凋亡)到PE膜聯蛋白V陽性和7-AAD陰性(早期細胞凋亡,膜完整性存在),最后到PE膜聯蛋白V和7-AAD陽性(終末期細胞凋亡和死亡)。細胞通過這三個階段的運動表明細胞凋亡。相比之下,表明細胞既是PE膜聯蛋白V陽性又是7-AAD陽性的單一觀察本身揭示了關于細胞經歷死亡過程的信息較少。
組件
組分A:RPE-膜聯蛋白V—1瓶
組分B:測定緩沖液(4°C)—1 瓶 (50 mL)
組件C:100X核紅色DCS™—1 瓶 (100 μL)
1. 用測試化合物制備細胞(200 μL/樣品)
2. 添加 RPE-膜聯蛋白 V 檢測溶液
3. 在室溫下孵育 20 - 60 分鐘
4. 使用575/26 nm濾光片(PE通道)的流式細胞儀分析細胞
儲備液的制備
除非另有說明,否則所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣,并在制備后儲存在-20°C。避免反復凍融循環(huán)。
1. RPE-膜聯蛋白 V 儲備溶液 (100X):
將 200 μL PBS 和 0.2% BSA 加入 RPE-膜聯蛋白 V 小瓶(組分 A)中,制成 100X RPE-膜聯蛋白 V 儲備溶液。注意:將重組的 100X RPE-膜聯蛋白 V 儲備溶液儲存在 4°C。 不要凍結。
實驗方案樣本
1. 用測試化合物處理細胞所需的時間(用星形孢菌素處理的Jurkat細胞為4-6小時)以誘導細胞凋亡。注意:貼壁細胞的膜聯蛋白V流式細胞術分析不常規(guī)測試,因為在細胞分離或收獲過程中可能發(fā)生特定的膜損傷。然而,利用膜聯蛋白V對貼壁細胞類型進行流式細胞術的方法先前已由Casiola-Rosen等人和van Engelend等人報道。
2. 離心細胞得到 1 - 5 × 105細胞/管。
3. 將細胞重懸于 200 μL 檢測緩沖液(組分 B)中。
4. 向細胞中加入 2 μL 100X RPE-膜聯蛋白 V 儲備溶液。
5. 自選:加入 2 μL 100X 核紅™ DCS(組分 C)用于壞死細胞。
6. 在室溫下孵育 20 至 60 分鐘,避光。
7. 可選:在使用流式細胞儀分析細胞之前,加入 200 至 300 μL 檢測緩沖液(組分 B)以增加體積。
8. 使用帶有575/26nm濾光片(PE通道)的流式細胞儀監(jiān)測RPE-膜聯蛋白V的熒光強度。當將核紅色™ DCS添加到細胞中時,使用660 / 20 nm濾光片(APC通道)測量細胞活力。
產品訂購信息:
22838 細胞計™ PE-Annexin V 結合細胞凋亡檢測試劑盒 *針對流式細胞術進行了優(yōu)化* 100Tests